Т спот тест противопоказания
После первичного контакта с микобактериями туберкулеза (инфицирования) болезнь может перейти на следующу стадию и тогда разовьется латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ).
ЛТИ — это еще не болезнь, но ее наличие — фактор повышенного риска развитие активной формы туберкулеза (болезни).
Внешне это совершенно здоровые люди!
По оценкам, у 10% иммунокомпетентных лиц с ЛТИ й в течение жизни развивается туберкулез.
- Примерно у половины этих людей заболевание туберкулезом развивается в течение первых двух лет после заражения,
- У второй половины туберкулез может развиться в течение жизни.
Риск прогрессирования от туберкулезной инфекции к туберкулезному заболеванию повышается у лиц с ослабленной иммунной системой.
Задача скрининга на туберкулез — вовремя выявить эти 10% людей, у которых произошел переход от простого инфицирования к ЛТИ и назначить им профилактическое лечение, чтобы не допустить перехода к стадии болезни. Около 2 миллиардов человек в мире имеют ЛТИ, но только у 10 млн в год есть риск заболеть туберкулезом.
Проба Манту в скрининге и диагностике
Если вы внимательно прочитали статью про пробу Манту, то знаете, что туберкулин, применяемый для проведения пробы Манту — это смесь множества антигенов человеческих (M. tuberculosis) и бычьих (M.bovis) микобактерий, а вакцина БЦЖ — это пра-пра-правнучка M.bovis.
Сложив вместе эти два факта мы получаем основной недостаток пробы Манту:
она хорошо справляется с задачей динамического скрининга, но хуже подходит для сиюминутной диагностики, т.к. может давать (+) реакцию у большинства привитых БЦЖ
В странах, где нет массовой вакцинации БЦЖ, пробой Манту пользоваться гораздо удобнее, не только как скрининговым методом, но и диагностическим. Но вот беда — именно там она не нужна массово, т.к. в этих странах совсем другой уровень заболеваемости туберкулезом и поголовный скрининг просто не нужен, только группам риска и то не везде. А там где массовый скрининг необходим (из-за высокой распространенности туберкулеза и высокого риска заражения) — всех прививают БЦЖ (ровно по той же причине). В этих странах продолжает оставаться актуальным вопрос дифференцирования постВакцинальной и постИнфекционной чувствительности к туберкулину.
Еще один недостаток пробы Манту состоит в том, что с ее помощью мы чаще всего не можем провести границу между инфицированием и латентной туберкулезной инфекцией (ЛТИ).
Новая страница в истории
В начале 2000-х появилась новая технология иммунодиагностики туберкулеза — Interferon-gamma release assays (IGRAs) — “тест высвобождения гамма-интерферона”.
Для проведения такого теста требуется забор крови из вены и ее исследование в лаборатории под воздействием микобактериальных антигенов. По сути, мы добиваемся такой же реакции, как при проведении пробы Манту, только вне организма и с некоторыми важными отличиями:
1. В отличие от туберкулина, применяемого для проведения ПМ, в IGRA-тестах для активации лимфоцитов применяют смесь из нескольких ВЫБОРОЧНЫХ антигенов (2 или 3 шт, в зависимости от теста). Эти антигены были выбраны потому, что они не встречаются в вакцинных штаммах БЦЖ и не свойственны большинству неТуберкулезных микобактерий, но присутствуют у возбудителя ТБ человека (M. tuberculosis) и других микобактериях “туберкулезного комплекса” (M.bovis, M.africanum, M.microti, M.canetti), потенциально патогенных для человека.
2. Еще одним важным отличием этих тестов от ПМ является то, что они выявляют реакции, присущие только лицам с наличием “активированного” инфекционного процесса начиная с ЛТИ, не затрагивая самую первую стадию — инфицирование. Представьте, что вы купили сим-карту и забыли про нее. Никто не знает, что она у вас есть. А если вы ее активировали и начали звонить с этого номера (не важно, один звонок был, или 1000), это уже можно отследить. Так же и тут.
Механизм работы IGRA-теста
✔️ В организме, в котором есть инфекционный ТБ процесс, вызванный M.tuberculosis, Т-лимфоциты под воздействием микобактериальных антигенов (МБА), специфических для этого возбудителя, начинают выделять гамма-интерферон (IFNγ).
✖️ В организме, где ТБ процесса нет, такой реакции НЕ БУДЕТ.
Эта методика не позволяет установить факт инфицирования. Только наличие “активированной” инфекции, начиная со стадии ЛТИ.
Чтобы эту реакцию “засечь”, нужно
- — взять кровь пациента с жизнеспособными иммунными клетками
- — выделить из нее лимфоциты
- — добавить к ним МБА и оставить на какое-то время, чтобы произошла реакция
- — посмотреть, начнут ли Т-лимфоциты выделять IFNγ
Т-спот — одна из разновидностей методики ELISpot
В России доступно 2 вида IGRA-тестов:
- QuantiFERON [Квантиферон] — рег.в РФ в 2010
- T-SPOT.TB [Т-спот] — рег.в РФ в 2012
Хотя они и основаны на одном принципе, но имеют отличия в методике детекци:
✔️ T-SPOT — проводится подсчет количества КЛЕТОК, которые выделяют IFNγ. Подсчет ведут по окрасившимся “отпечаткам” лимфоцитов на дне лунки, где происходила инкубация.
✔️ QuantiFERON — определяют количество (концентрацию) IFNγ в исследуемом образце.
Когда я готовила этот материал у меня сложился пазл! Эта разница в методах заложена прямо в их названиях!
Отпечатки = пятна = spot. А “Т” — это “Т-лимфоцит”. То есть T-SPOT = буквально “отпечаток Т-лимфоцита”.
QuantiFERON — от “Quanti” — “количество” и “FERON” — интерферон
Еще одним важным отличием является точка контакта клеток крови с антигенами:
T-SPOT.TB — Забор крови производится в обычную пробирку. Ее доставляют в лабораторию и уже там проводят инкубацию с МБА.
QuantiFERON — при применении наборов последнего поколения (QuantiFERON Golg in Tube) pабор крови осуществляется в специальные пробирки (несколько штук), в которые УЖЕ содержат МБА, + пробирки с положительным и отрицательным контролем. Так что контакт с МБА начинается сразу.
Обратите внимание, что данные тесты не выявляют сами микобактерии как таковые, а только признаки их активности. А еще не дают ответа ГДЕ именно в организме (в легких, почках, кишечнике…), поэтому также как и кожные пробы должны оцениваться в комплексе с другими методами диагностики.
ПЛЮСЫ IGRA-тестов
➕ Высокая специфичность и отсутствие перекрестной реакции у привитых БЦЖ
➕ Более объективная оценка результатов (в сравнении с кожными пробами)
➕ Не нужен отдельный визит к врачу для оценки результата, как при кожной пробе
➕ Подходит для лиц с абсолютными противопоказаниями к проведению кожных проб
МИНУСЫ IGRA-тестов
➖ Требуется забор крови из вены Для маленьких детей это является серьезным лимитирующим фактором. Для квантиферонового теста крови нужно МНОГО (3-4 пробирки). Для Т-спота — меньше (одна пробирка). Например, если родители против прививок и кожных тестов, то им нужно 2 раза в год брать у ребенка кровь из вены начиная с 6-месячного возраста…
➖ Стоимость Это очень дорогие исследования, и не только в России. На сегодня Квантифероновый тест в СПб с забором материала — 6000р, Т-спот 8000р. Для массового скрининга могут применяться только в странах с очень высоким уровнем дохода.
➖ Логистика — Температура транспортировки и хранения. Как уже озвучила в описании методики, для выполнения анализа нужна кровь с живыми клетками! Нарушение температурного режима (+18- +25) может привести к тому, что материал будет испорчен и анализ недостоверен. Для Т-Спот это принципиально, тк контакт с антигенами происходит уже после транспортировки. Это может привести к ложно-отрицательному результату! — Образцы крови должны быть проанализированы через 8-24 часов после забора (для T-spot — 32 часа).
➖ Специальное лабораторное оборудование, обученный персонал. Для проведения кожных проб не требуется специального оборудования, манипуляция осуществляется медицинским персоналом. Для проведения IGRA-тестирования требуется гораздо больше. Поэтому в России существует всего порядка 50 лабораторий, которые могут самостоятельно их выполнять. В большинстве мест происходит только забор крови, а выполнение осуществляется по договору в другом месте, чаще в большой коммерческой профильной лаборатории в Москве.. Для родителя этот пункт не имеет большого значения, это, скорее, к вопросу доступности и соблюдения предыдущего пункта, если речь идет об удаленном от центра регионе.
Для стран с низким уровнем доходов рекомендации ВОЗ таковы:
“IGRA более дорогостоящий и технически сложный процесс, чем проба Манту. Учитывая сопоставимую производительность, но повышенную стоимость, замена пробы Манту на IGRA-тесты в качестве метода скрининга в условиях ограниченных ресурсов не рекомендуется. Коммерческие IGRA-тесты одобрены FDA как косвенные и дополнительные тесты на инфекцию ТБ в сочетании с оценкой риска, рентгенографией и другими медицинскими и диагностическими оценками. Существует несколько международных руководств по их использованию в странах с высоким уровнем дохода”. [1]
Что говорит по поводу IGRA-тестов Medscape?
▪️ Исследования, оценивающие показатели IGRA у детей, скудны.
▪️ Неопределенные результаты для детей являются потенциальным ограничением для внедрения IGRA в клиническую практику. Частота неопределенных результатов IGRA у детей различна (диапазон 0–17%), и большинство из них связаны с низким уровнем реакции на стимуляцию микобактериальными антигенами в результате недостаточной иммунологической зрелости. Неопределенные результаты анализа QFT-InTube чаще встречаются среди детей младшегоо́возраста.
▪️ Трудности в сборе крови для этих анализов и потребность в относительно большом объеме крови у маленьких детей (особенно у младенцев) также являются ограничениями. [2]
Из инструкции к набору Т-Спот
Эффективность теста T-SPOT.TB не была адекватно оценена с образцами от лиц моложе 17 лет, у беременных женщин и у пациентов с гемофилией [3]. А ведь как правило желание сделать не Манту, а такой тест есть у родителей МАЛЕНЬКИХ детей.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ
ОЧЕНЬ расстраивает информация из рунета, сильно искажающая сведения об этих тестах в позитивную сторону, и умалчивая о недостатках. Особенно бросается в глаза то, что у этих тестов якобы вообще нет противопоказаний и ничто не влияет на результаты теста. Как так? В организме влияет, а в пробирке не влияет? Клетки те же самые, только их достали. В западных источниках информация больше похожа на правду. CDC рекомендует соблюдать не менее 4-6 недель интервала между живыми инъекционными вакцинами (КПК, Ветряная оспа) и проведением этого теста. После перенесенной кори, краснухи, паротита и ветрянки, соответственно, тоже! Так что в случае плановой вакцинации живыми инъекционными вакцинами стОит делать забор крови до вакцинации либо в один день с прививкой.[3]
ВЫВОДЫ
IGRA-тесты — это не панацея. У них есть свои преимущества и свои недостатки. У них тоже бывают ложно(+) и ложно(-) результаты. Это не полные аналоги пробы Манту (не выявляют стадию инфицирования) и маловероятно, что в ближайшее время в России или странах постсоветского пространства станут применяться в качестве метода скрининга ТБ. Только как дополнительный метод диагностики. Хотя, благодаря локализации производства в России цена на T-SPOT.TB в ближайшее время может быть снижена, а тест станет доступен по ОМС для лиц с реальными противопоказаниями к проведению кожных проб. Приведу аналогию. Если вам нужно просто перевезти из точки А в точку Б 100 человек, то оптимально будет нанять автобус. Если у вас 10 человек, то вам хватит маршрутки. А если нужно срочно доставить пострадавшего в больницу, то машина скорой помощи. Для разных задач разные решения являются лучшими.
Если я отказываюсь от проведения проб реакции Манту или Диаскин-теста моему ребенку, какие другие методы ранней диагностики туберкулеза в настоящее время имеются?
При отказе родителей ребенка от проведения внутрикожных проб на туберкулезную инфекцию, возможно назначение альтернативных методов обследования с целью исключения туберкулеза у ребенка. К таким методам обследования относятся следующие диагностические тесты: квантифероновый тест (QuantiFERON-TB Gold) и тест T-SPOT.TB. В обоих случаях для проведения исследования осуществляется забор крови из вены. Положительные результаты тестов указывают на активность туберкулезной инфекции и предполагают назначение дополнительного обследования для исключения локального туберкулеза. Отрицательные результаты тестов in vitro при отсутствии клинических симптомов заболевания позволяют врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза. (с сайта правительства СПБ) [7]
1 Рекомендации ВОЗ по применению IGRA тестов в странах с низким уровнем доходов
2 Рекомендации MedScape про применению QuantiFERON-TB теста (QFT), QuantiFERON-TB Gold теста (QFT-G), QuantiFERON-TB Gold In-Tube теста (QFT-GIT), и T-SPOT.TB теста (T-Spot).
3 T-SPOT.TB — инструкция по применению (оригинал)
4 QuantiFERON-TB Gold Plus — описание метода (на русском)
5 QuantiFERON-TB Gold Plus — Инструкция по применению (оригинал)
6 Презентация ВОЗ о QuantiFERON-TB Gold Plus
7 Какие методы исследования годятся, если я хочу отказаться от пробы Манту и Диаскинтеста? (Сайт правительства СПБ)
Одним из самых новых средств выявления туберкулёза на сегодняшний день является тест T spot TB. В России он применяется с 2012 года, а в мире эта методика успешно помогает диагностировать инфицирование микобактериями туберкулёза уже более 12 лет. Чувствительность и информативность Т-спот очень высока. В сравнении с традиционной пробой манту и относительно новым диаскинтестом, эффективность данной методики оценивается на уровне 97-98%.
T spot TB — это международное название. Оно состоит из названия лимфоцитов, реакция которых оценивается в ходе проведения теста; слова «spot», что в переводе означает «пятно» и международной аббревиатуры TB, принятой для обозначения туберкулёза.
Суть метода
Для проведения теста необходим забор венозной крови. Методика выявляет не самих возбудителей туберкулёза, а реакцию иммунной системы организма на них. Микобактерии содержат специфические антигены, на которые иммунитет реагирует активизацией клеток-лимфоцитов крови. Анализ Т спот определяет присутствие этих активизированных лимфоцитов в крови пациента.
Кровь обрабатывают специфическими антигенами микобактерий и смотрят, как на это отреагируют лимфоциты. Эти клетки начинают активную выработку цитокинов и гамма-интерферонов, происходит образование комплексов иммунной защиты. Под электронным микроскопом эти защитные образования можно визуально определить как пятна. Наличие таких пятен говорит о положительной реакции на туберкулёз, так как лимфоцитам знакомы антигены микобактерий. Т спот тест позволяет также оценить количественные характеристики возбудителя болезни. Чем больше пятен в определённом количестве крови, тем более велика концентрация микобактерий в организме.
Проведение теста и оценка результатов
Кровь для тестирования можно брать в любое время дня. Желательно не принимать пищу за два часа до взятия пробы. Кровь берётся из вены и помещается в ёмкость с веществом, препятствующим свёртыванию. Инструкция говорит, что пробирки не подвергают охлаждению или заморозке и доставляют в лабораторию в течение 8 часов. Результаты лабораторного анализа пациент узнает максимум через три дня.
Отсутствие специфических пятен-спотов в крови говорит об отрицательном результате теста. Наличие реакции лимфоцитов на антигены является признаком присутствия микобактерий в организме. Диагностика туберкулёзной инфекции с помощью теста Т спот не позволяет определить стадию и форму заболевания, однако при ней выявляется даже латентная и закрытая форма туберкулёза. Положительный результат Т спот теста требует тщательного обследования пациента фтизиатром и проведения рентгенологического исследования.
Основные преимущества Т спот
Проба Манту и даже диаскинтест имеют ряд противопоказаний, которые отсутствуют у теста Т spot. При этом не имеет значения, вакцинирован ли пациент от туберкулёза, что очень важно, ведь практически у каждого россиянина есть прививка БЦЖ. Для проведения теста нет никаких ограничений по времени.
Сомнительный результат тестирования — крайне редкое явление.
Тест Т спот выявляет все формы туберкулёза, в том числе латентную и закрытую, когда у пациента нет симптомов заболевания, и он не заразен. Также преимуществом этой методики является однозначное выявление внелёгочных форм. На результативность анализа не оказывает влияния состояние пациента, наличие у него аутоиммунных и острых инфекционных заболеваний, аллергических реакций, любых кожных патологий. Также не влияет на результат приём пациентом любых лекарственных препаратов.
Показания к проведению
- Применение Т спот ТБ теста показано детям дошкольного и школьного возраста, у которых есть противопоказания к проведению кожных проб на туберкулёз, аллергия на туберкулин, недавно была проведена вакцинация БЦЖ, а также детям с ложноположительной пробой Манту.
- Также показано проведение именно теста Т спот людям, вернувшимся из стран с неблагоприятной эпидемиологической обстановкой по туберкулёзу, контактировавшим с заражёнными.
- Лицами, находящимся в местах лишения свободы или освободившихся.
- Лицам, у которых диагностирована ВИЧ-инфекция.
Проведение тестирования Т спот совершенно безвредно для беременных и кормящих женщин, если у них есть признаки заболевания. Показан тест пациентам, проходящим лечение препаратами или методами, угнетающими иммунитет, имеющим патологии, снижающие защитные функции организма. Особенно хорошо эта методика помогает для выявления туберкулёза, если есть подозрение на внелёгочную форму.
Тест Т спот в диагностике туберкулёза у детей
Если у ребёнка когда-либо была выявлена аллергическая реакция, в том числе на медикаменты, лучше не подвергать его проведению пробы Манту. Детям с иммунодефицитом или аллергией на туберкулин, ВИЧ-инфицированным, недавно прошедшим вакцинацию БЦЖ, для выявления туберкулёзной инфекции следует пройти Т спот. Это позволит выявить наличие или отсутствие туберкулёза до проведения рентгенологического исследования.
Цена на анализ колеблется в зависимости от региона, но нужно сказать, что его стоимость довольно высока и может составлять около шести тысяч рублей. Однако родителям болезненных детей, страдающих соматическими заболеваниями, аллергиями, а также контактировавших с носителями инфекции, лучше подстраховаться и сделать этот тест на туберкулёз.
Чем отличается квантифероновый тест и диаскинтест от Т- спот
Диагностика с помощью квантиферонового теста и теста Т спот, пожалуй, одинаково информативна и точна. Отличия только в лабораторной части исследования. Квантифероновый тест направлен на выявление гамма-интерферонов, который синтезируется клетками иммунной системы, как реакция на возбудителя туберкулёзной инфекции. Тест Т спот выявляет наличие самих Т-лимфоцитов (клеток иммунной системы).
Диаскинтест выявляет кожную реакцию, имеет некоторые противопоказания, не показывает количественную оценку патогенов. Он намного уступает тесту Т спот по чувствительности, чаще даёт ложноположительный ответ, сильно зависит от вакцинации БЦЖ, почти бесполезен при наличии у пациента ВИЧ-инфекции.